Invivosciences Palpator是一種測量細胞收縮和細胞外基質(zhì)的三維組織結構的剛度的自動檢測系統(tǒng)。該系統(tǒng)
敏感性非常高,可以對細胞和組織力的物理屬性和對應的生理狀態(tài)進行分析報告。
應用領域:
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細胞收縮
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細胞外基質(zhì)硬度
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心臟收縮力檢測
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毒性測定
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細胞收縮的信號轉導研究
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**對細胞長期(天,周,月)的療效和毒性測試
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醫(yī)藥化合物篩選
測量過程快速且容易操控:
每個樣品力學性能的測試時間不到10 秒,對于化學**(例如,**和
化妝品的產(chǎn)品)對三維生物組織的急性和長期影響,可使用附帶的數(shù)據(jù)分析軟件快速分析完成。
高重復性:Palpator?通過的樣品拉伸來測量壓力。通過使用IVS **產(chǎn)品——MC-8?構建相同的組織,四
個不同的培養(yǎng)皿中可以顯示幾乎相同的反應力曲線(紅色,藍色,綠色,淡藍色的點)。
Invivosciences Palpator科研中的應用領域

細胞及組織的力學性能(Cell and Tissue Mechanics)
Palpator儀器系統(tǒng)可以快速和重復測量細胞和組織的力學性能(例如收縮力和硬度)。
palpator通過在組織上將力探針自動定位然后緩慢拉伸或者壓迫組織結構,在這個過程中,組織所產(chǎn)生的阻力可被探針實時檢測到,并被快速地記錄下來,形成力譜文件。然后通過數(shù)學模型來進行擬合和計算活細胞之間的收縮作用力以及組織結構的被動壓力作用下的硬度。
細胞活性- MTT 分析(Viability— MTT Assay)
MTT 全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,漢語化學名為 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽,商品名:噻唑藍。
噻唑藍比色法(MTT 法)主要用于分析化合物及培養(yǎng)環(huán)境的變化的細胞的毒性影響??捎糜诜治鋈S組織暴露于化學物質(zhì)和環(huán)境應力(例如輻射和缺氧)條件下細胞活性的變化情況。
原理是MTT 可作為哺乳類動物細胞線粒體中琥珀酸脫氫酶的底物。當有活細胞存在時,線粒體內(nèi)琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT 還原成紫藍色的晶狀甲瓚(Formazan),將結晶的甲瓚溶解釋放,再用酶聯(lián)**檢測儀測定吸光度OD 值,OD 值的高低可間接反映活細胞的數(shù)量及其活性。目前MMT 法已經(jīng)成為被廣泛用于細胞活性高通量測量有用的工具。

技術優(yōu)勢:
. 快速評估細胞種植在自然的三維(3D)微觀環(huán)境中的活力
. 在以細胞和組織為基礎的試驗中,可顯著提高檢測靈敏度的信號
. 可聯(lián)系細胞活性分析細胞的多種生理參數(shù),比如收縮力和活力
. 在長時間(幾周)用于培養(yǎng)和重新構建三維組織的實驗研究,實現(xiàn)**的觀測

絲狀肌動蛋白(F-actin)量化分析(Quantify Filamentous Actin)
肌動蛋白細胞骨架負責維持細胞的形狀,并使細胞具有張力和抗剪切力,同時對于細胞的運動、收縮和胞質(zhì)分裂具有重要作用。F-肌動蛋白的形成和保持,可改變細胞力的生成過程,可改變細胞生理性能,并可導致細胞死亡。細胞F-肌動蛋白含量的定量監(jiān)測是生物醫(yī)藥研究領域,包括細胞生物學和癌癥研究過程中重要的研究內(nèi)容。

技術優(yōu)勢:
. 可用于評估和監(jiān)測肌動蛋白細胞骨架的完整性。對于嵌入在三維組織結構中的細胞,由于其被固定化然后成為透性化細胞,再用熒光標記的鬼筆環(huán)肽標記,以此來表明絲狀肌動蛋白(F-肌動蛋白)的位置。通過熒光讀取器可量化分析每種構建的組織的肌動蛋白細胞骨架的完整性。
. 由于三維生長環(huán)境比常用的二維(2D)培養(yǎng)環(huán)境更自然也更適合培養(yǎng)細胞,所以其可評估三維生長環(huán)境下細胞F-actin 的含量。
. F-肌動蛋白含量可與細胞和組織的生理多參數(shù)聯(lián)系分析(可與MTT 法以及Palpator技術聯(lián)合應用)
. 培養(yǎng)和重新評估長時間(幾天和幾周時間)的三維組織建構試驗效果,來取得**的測量數(shù)值
. 肌動蛋白的相關參數(shù)可與細胞生理指標參數(shù)聯(lián)合分析細胞的收縮力和活力。
三維構建組織形態(tài)觀察(Microscopic Examination of 3D Tissue Constructs)

細胞形態(tài)學觀察是研究細胞的行為和生理的必要工具。通過采用適當?shù)闹笜?,細胞中特定的細胞成分的分布可以被觀察、量化和監(jiān)測。本**(MC-8?)配備了頂部敞開和底部透明的三維組織培養(yǎng)室,可進行相位和熒光顯微鏡的觀測和分析。這個特性可以對三維基質(zhì)中更接近體內(nèi)培養(yǎng)的細胞生長的生理形態(tài)更方便的觀察。
技術優(yōu)勢:

可對活細胞和三維構建組織進行形態(tài)學的觀測。通過使用熒光指示劑對細胞成分進行標記,可對特定的組織結構進行可視化區(qū)分。在一個小型的三維組織培養(yǎng)室(MC-8?)中的培養(yǎng)體可以直接在10×的倒置顯微鏡下檢查。同樣的組織也可以從培養(yǎng)室中取出進行熒光共聚焦顯微鏡的觀測。
.研究和在更接近自然條件下三維生長環(huán)境中的細胞的生理形態(tài);
.使用相位和熒光顯微鏡實時跟蹤細胞和細胞內(nèi)成分的變化
.通過Palpator?技術可以綜合研究細胞形態(tài)、細胞骨架完整性以及與三維組織收縮力之間的關