Invivosciences Palpator是一種測(cè)量細(xì)胞收縮和細(xì)胞外基質(zhì)的三維組織結(jié)構(gòu)的剛度的自動(dòng)檢測(cè)系統(tǒng)。該系統(tǒng)
敏感性非常高,可以對(duì)細(xì)胞和組織力的物理屬性和對(duì)應(yīng)的生理狀態(tài)進(jìn)行分析報(bào)告。
應(yīng)用領(lǐng)域:
測(cè)量過程快速且容易操控:
每個(gè)樣品力學(xué)性能的測(cè)試時(shí)間不到10 秒,對(duì)于化學(xué)**(例如,**和
化妝品的產(chǎn)品)對(duì)三維生物組織的急性和長(zhǎng)期影響,可使用附帶的數(shù)據(jù)分析軟件快速分析完成。
高重復(fù)性:Palpator?通過的樣品拉伸來測(cè)量壓力。通過使用IVS **產(chǎn)品——MC-8?構(gòu)建相同的組織,四
個(gè)不同的培養(yǎng)皿中可以顯示幾乎相同的反應(yīng)力曲線(紅色,藍(lán)色,綠色,淡藍(lán)色的點(diǎn))。
Invivosciences Palpator科研中的應(yīng)用領(lǐng)域

細(xì)胞及組織的力學(xué)性能(Cell and Tissue Mechanics)
Palpator儀器系統(tǒng)可以快速和重復(fù)測(cè)量細(xì)胞和組織的力學(xué)性能(例如收縮力和硬度)。
palpator通過在組織上將力探針自動(dòng)定位然后緩慢拉伸或者壓迫組織結(jié)構(gòu),在這個(gè)過程中,組織所產(chǎn)生的阻力可被探針實(shí)時(shí)檢測(cè)到,并被快速地記錄下來,形成力譜文件。然后通過數(shù)學(xué)模型來進(jìn)行擬合和計(jì)算活細(xì)胞之間的收縮作用力以及組織結(jié)構(gòu)的被動(dòng)壓力作用下的硬度。
細(xì)胞活性- MTT 分析(Viability— MTT Assay)
MTT 全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,漢語(yǔ)化學(xué)名為 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽,商品名:噻唑藍(lán)。
噻唑藍(lán)比色法(MTT 法)主要用于分析化合物及培養(yǎng)環(huán)境的變化的細(xì)胞的毒性影響??捎糜诜治鋈S組織暴露于化學(xué)物質(zhì)和環(huán)境應(yīng)力(例如輻射和缺氧)條件下細(xì)胞活性的變化情況。
原理是MTT 可作為哺乳類動(dòng)物細(xì)胞線粒體中琥珀酸脫氫酶的底物。當(dāng)有活細(xì)胞存在時(shí),線粒體內(nèi)琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT 還原成紫藍(lán)色的晶狀甲瓚(Formazan),將結(jié)晶的甲瓚溶解釋放,再用酶聯(lián)**檢測(cè)儀測(cè)定吸光度OD 值,OD 值的高低可間接反映活細(xì)胞的數(shù)量及其活性。目前MMT 法已經(jīng)成為被廣泛用于細(xì)胞活性高通量測(cè)量有用的工具。
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技術(shù)優(yōu)勢(shì):
. 快速評(píng)估細(xì)胞種植在自然的三維(3D)微觀環(huán)境中的活力
. 在以細(xì)胞和組織為基礎(chǔ)的試驗(yàn)中,可顯著提高檢測(cè)靈敏度的信號(hào)
. 可聯(lián)系細(xì)胞活性分析細(xì)胞的多種生理參數(shù),比如收縮力和活力
. 在長(zhǎng)時(shí)間(幾周)用于培養(yǎng)和重新構(gòu)建三維組織的實(shí)驗(yàn)研究,實(shí)現(xiàn)**的觀測(cè)
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絲狀肌動(dòng)蛋白(F-actin)量化分析(Quantify Filamentous Actin)
肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架負(fù)責(zé)維持細(xì)胞的形狀,并使細(xì)胞具有張力和抗剪切力,同時(shí)對(duì)于細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)、收縮和胞質(zhì)分裂具有重要作用。F-肌動(dòng)蛋白的形成和保持,可改變細(xì)胞力的生成過程,可改變細(xì)胞生理性能,并可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。細(xì)胞F-肌動(dòng)蛋白含量的定量監(jiān)測(cè)是生物醫(yī)藥研究領(lǐng)域,包括細(xì)胞生物學(xué)和癌癥研究過程中重要的研究?jī)?nèi)容。

技術(shù)優(yōu)勢(shì):
. 可用于評(píng)估和監(jiān)測(cè)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的完整性。對(duì)于嵌入在三維組織結(jié)構(gòu)中的細(xì)胞,由于其被固定化然后成為透性化細(xì)胞,再用熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽標(biāo)記,以此來表明絲狀肌動(dòng)蛋白(F-肌動(dòng)蛋白)的位置。通過熒光讀取器可量化分析每種構(gòu)建的組織的肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的完整性。
. 由于三維生長(zhǎng)環(huán)境比常用的二維(2D)培養(yǎng)環(huán)境更自然也更適合培養(yǎng)細(xì)胞,所以其可評(píng)估三維生長(zhǎng)環(huán)境下細(xì)胞F-actin 的含量。
. F-肌動(dòng)蛋白含量可與細(xì)胞和組織的生理多參數(shù)聯(lián)系分析(可與MTT 法以及Palpator技術(shù)聯(lián)合應(yīng)用)
. 培養(yǎng)和重新評(píng)估長(zhǎng)時(shí)間(幾天和幾周時(shí)間)的三維組織建構(gòu)試驗(yàn)效果,來取得**的測(cè)量數(shù)值
. 肌動(dòng)蛋白的相關(guān)參數(shù)可與細(xì)胞生理指標(biāo)參數(shù)聯(lián)合分析細(xì)胞的收縮力和活力。
三維構(gòu)建組織形態(tài)觀察(Microscopic Examination of 3D Tissue Constructs)

細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察是研究細(xì)胞的行為和生理的必要工具。通過采用適當(dāng)?shù)闹笜?biāo),細(xì)胞中特定的細(xì)胞成分的分布可以被觀察、量化和監(jiān)測(cè)。本**(MC-8?)配備了頂部敞開和底部透明的三維組織培養(yǎng)室,可進(jìn)行相位和熒光顯微鏡的觀測(cè)和分析。這個(gè)特性可以對(duì)三維基質(zhì)中更接近體內(nèi)培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)的生理形態(tài)更方便的觀察。
技術(shù)優(yōu)勢(shì):

可對(duì)活細(xì)胞和三維構(gòu)建組織進(jìn)行形態(tài)學(xué)的觀測(cè)。通過使用熒光指示劑對(duì)細(xì)胞成分進(jìn)行標(biāo)記,可對(duì)特定的組織結(jié)構(gòu)進(jìn)行可視化區(qū)分。在一個(gè)小型的三維組織培養(yǎng)室(MC-8?)中的培養(yǎng)體可以直接在10×的倒置顯微鏡下檢查。同樣的組織也可以從培養(yǎng)室中取出進(jìn)行熒光共聚焦顯微鏡的觀測(cè)。
.研究和在更接近自然條件下三維生長(zhǎng)環(huán)境中的細(xì)胞的生理形態(tài);
.使用相位和熒光顯微鏡實(shí)時(shí)跟蹤細(xì)胞和細(xì)胞內(nèi)成分的變化
.通過Palpator?技術(shù)可以綜合研究細(xì)胞形態(tài)、細(xì)胞骨架完整性以及與三維組織收縮力之間的關(guān)