美國FiberCell systems有限公司一直**于提供簡(jiǎn)單易用的中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng), 讓研究人員和生物技術(shù)公司生產(chǎn)高質(zhì)量的細(xì)胞及細(xì)胞產(chǎn)物。大量成果是使用傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)方法不能達(dá)到的。
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單抗生產(chǎn)
重組蛋白
內(nèi)皮細(xì)胞
體外毒性研究
條件培養(yǎng)基
病毒
外泌體
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1. 中空纖維采用親水性聚砜/聚氯乙烯，形成不同濾過率的中空纖維膜，適合批量 生產(chǎn)不同分子量大小的生物活性物質(zhì)（單克隆抗體，重組蛋白等）。
2. 大量中空纖維組裝成波浪狀結(jié)構(gòu)，提供懸浮細(xì)胞*佳的生長環(huán)境。
3. 中空纖維容量為有限的幾十毫升，高密度的細(xì)胞濃度降低血清需求量。
4. 采用雙式系統(tǒng)，節(jié)約空間，整個(gè)系統(tǒng)可置于任何標(biāo)準(zhǔn)大小的培養(yǎng)箱中。
5. 操作簡(jiǎn)單，每天僅需15min的維護(hù)時(shí)間，收獲產(chǎn)物，檢查葡萄糖消耗。
6. 節(jié)約成本，不需要更換耗材，可進(jìn)行長達(dá)六個(gè)月的細(xì)胞培養(yǎng)。
7. 可替代傳統(tǒng)的培養(yǎng)耗材，培養(yǎng)瓶，滾瓶，小鼠腹水等。
8. 產(chǎn)物產(chǎn)量高，純度好，利于產(chǎn)物的后期處理。
9. 三維的培養(yǎng)空間更好的模擬了生物體內(nèi)環(huán)境，利于細(xì)胞長期生長，保持不分化狀態(tài)，是科研必不可少的工具。
FiberCell中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)介紹
FiberCell整個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)由3部分組成，中空纖維培養(yǎng)筒、蠕動(dòng)泵和儲(chǔ)液瓶。細(xì)胞接種于中空纖維培養(yǎng)筒中；儲(chǔ)液瓶盛裝細(xì)胞培養(yǎng)基，通過硅膠管與培養(yǎng)筒相連接；培養(yǎng)筒固定在蠕動(dòng)泵上面，蠕動(dòng)泵通過擠壓硅膠管使培養(yǎng)基在培養(yǎng)筒中循環(huán)流動(dòng)，提供營養(yǎng)物質(zhì)并進(jìn)**體交換。系統(tǒng)小巧方便，適用于放入市面上任何尺寸大小的二氧化碳培養(yǎng)箱。
中空纖維采用親水性polysulfone/PVC (聚砜/聚氯乙烯)，形成不同濾過率的中空纖維膜，適合批量生產(chǎn)不同分子量大小的生物活性物質(zhì)（單克隆抗體，重組蛋白等）。
中空纖維生物反應(yīng)器的一個(gè)特點(diǎn)是培養(yǎng)的細(xì)胞濃度可以超過108/mL。而一般的旋轉(zhuǎn)燒瓶培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞濃度大約是106/mL。高濃度細(xì)胞可以產(chǎn)生高濃度分泌蛋白，并能進(jìn)行有效地細(xì)胞感染，還可以減少細(xì)胞對(duì)血清的需求甚至使細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中生長。
FiberCell中空纖維培養(yǎng)系統(tǒng)（Hollow fiber cell culture bioreactor）應(yīng)用領(lǐng)域：
1) 單克隆抗體試驗(yàn)生產(chǎn)或量產(chǎn)Monoclonal Antibodies: 每月可生產(chǎn)100 mg-2000 mg抗體，比用培養(yǎng)瓶生產(chǎn)抗體的濃度高100倍，可達(dá)到0.5-5 mg/mL;
2) 重組蛋白表達(dá)或量產(chǎn) Recombinant Proteins :每天可生產(chǎn)1-10 mg重組蛋白，生產(chǎn)分泌蛋白的表達(dá)量是培養(yǎng)瓶培養(yǎng)的100倍，可達(dá)到100-500μg/mL；
3) 病毒擴(kuò)增 Virus Production: 運(yùn)用 Virus Production可生產(chǎn)超過1-3×1013 病毒顆粒，相當(dāng)于20個(gè)滾瓶的產(chǎn)量;
4) **細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)及研究 Lymphocyte Expansion: 細(xì)胞培養(yǎng)濃度可達(dá)1×108/mL；
5) 病原體培養(yǎng) Malaria Culture一次培養(yǎng)可收獲相當(dāng)于60個(gè)T25培養(yǎng)瓶的產(chǎn)量。
6) 體外毒性研究與分析 In Vitro Toxicology ; 檢驗(yàn)**、抗病菌（包含HIV/HBV/HCV）以及抗寄生蟲等**反應(yīng)、研究及生物測(cè)試；
7) 條件培養(yǎng)液和細(xì)胞因子的生產(chǎn) Conditioned Medium & Cytokine Production ;
8) 內(nèi)皮細(xì)胞 /肌細(xì)胞培養(yǎng)及形態(tài)研究 Endothelial Cells/Muscle Cells : 在纖維內(nèi)培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞的同時(shí)，可在纖維外層培養(yǎng)另一種細(xì)胞（如血管平滑肌細(xì)胞）。纖維內(nèi)表面積相當(dāng)于一個(gè) T75培養(yǎng)瓶，一個(gè)培養(yǎng)筒可提取約100mg的RNA量。并可通過調(diào)整剪切力大小誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生形態(tài)改變，模擬體內(nèi)正常與異常血壓；
9) 人工器官研究 Artificial Organ Research;
10) 干細(xì)胞培養(yǎng)與其他細(xì)胞外基質(zhì)和細(xì)胞 因子培養(yǎng)
外觀尺寸： 20 cm X 38 cm X 20 cm
重量： 4.2 kg
電源：100/120/220 V；50/60 Hz
FiberCell中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)Duet泵適合FiberCell所有的中空纖維培養(yǎng)筒。Duet泵可以同時(shí)啟動(dòng)2個(gè)培養(yǎng)筒。
恒定流量與溶氧處理是中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)模型的關(guān)鍵。FiberCell Duet泵可以根據(jù)使用的培養(yǎng)筒來調(diào)節(jié)流量范圍：1 mL/min - 140 mL/min.
Cat# C2025 0.1 μm 孔徑提供大的交換速率，活化的纖維質(zhì)，利于基質(zhì)蛋白、細(xì)胞因子與抗體吸附。是培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞與肝細(xì)胞的理想纖維質(zhì)。
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Cat# C2008低的截留分子量 (MWCO 5 kd @ 50%) 親水性纖維質(zhì)截留小的分子。建議表達(dá)25 kd - 100 kd 重組蛋白。適合培養(yǎng)懸浮細(xì)胞系包括CHO, HeLa 與 293細(xì)胞。細(xì)胞量能達(dá)到 109 ，20 mL ECS中重組蛋白的密度達(dá)到100 μg/mL 或以上。
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Cat# C2011 高的截留分子量 (MWCO 20 kd @ 50%)親水性纖維質(zhì)截留大的重組蛋白。 適合雜交瘤細(xì)胞與**細(xì)胞培養(yǎng)。 20 kd MWCO 允許TGF beta 與 TNF alpha 分散掉同時(shí)保留抗體。細(xì)胞量能達(dá)到 109 ，每?jī)商炷苁斋@ 1-20 mg 重組蛋白與 5-100 mg 單抗。
Cat# C5011 類似 C2011 但是是其2倍的生產(chǎn)能力，是C2011單抗密度的2倍。C5011溶氧能力是C2011的2倍。
Cat# C2003低的截留分子量 (MWCO 5 kd @ 50%) 親水性纖維質(zhì)截留小的分子。建議表達(dá)25 kd - 100 kd 重組蛋白。
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Cat# C2018高的截留分子量 (MWCO 20 kd @ 50%)親水性纖維質(zhì)截留大的重組蛋白 。適合雜交瘤細(xì)胞與**細(xì)胞培養(yǎng)。 20 kd MWCO 允許TGF beta 與 TNF alpha 分散掉同時(shí)保留抗體。細(xì)胞量能達(dá)到 1011 ，每?jī)商炷苁斋@75-150 mg 單抗。 適合貼壁細(xì)胞系培養(yǎng)如：CHO、 HeLa、293 細(xì)胞。 70 mL ECS中重組蛋白收獲量達(dá)到100 μg/mL/day。
Cat# C4005 C4005培養(yǎng)筒不含導(dǎo)流硅膠管與注氧管。高的總過濾速率與聚砜纖維質(zhì)比醋酸纖維質(zhì)更適合重組蛋白的生產(chǎn)。
Cat# C4020C4020培養(yǎng)筒不含導(dǎo)流硅膠管與注氧管。高的總過濾速率與聚砜纖維質(zhì)比醋酸纖維質(zhì)更適合重組蛋白與單抗的生產(chǎn)。
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型號(hào)
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大小
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表面積
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纖維質(zhì)型號(hào)
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包裝密度
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ECS 容積
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MWCO 50%
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細(xì)胞*大培養(yǎng)量
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C2025
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Small
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75 cm2
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activated PS
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30%
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2.5 mL
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C2008
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Medium
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3000 cm2
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low flux PS
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50%
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20 mL
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C2011
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Medium
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3000 cm2
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high flux PS
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50%
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20 mL
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C2003
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Large
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1.2 m2
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low flux PS
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50%
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70 mL
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C2018
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Large
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1.2 m2
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high flux PS
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50%
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70 mL
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C4005
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X-Large
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2.5 m2
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low flux PS
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50%
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150 mL
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C3008
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Medium
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2000 cm2
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Cellulosic
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38%
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12 mL
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10 kd
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109
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C4020
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X-Large
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2.5 m2
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high flux PS
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50%
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150 mL
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C5011
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Medium
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3000 cm2
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high flux PS
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50%
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20 mL
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20 kd
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2 x 109
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Oxy0.6
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80mls
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6000 cm2
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Hydrophobic
Polyethylene
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N/A
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40 mL
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100 kd
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N/A
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血清替代物 CDM-HD Serum Replacement
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特點(diǎn)
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優(yōu)勢(shì)
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化學(xué)成分限定
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無批次間差異
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無蛋白
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產(chǎn)物純化簡(jiǎn)便
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無動(dòng)物來源
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無不明來源支原體與病毒
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干粉狀
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保質(zhì)期長
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4℃儲(chǔ)存
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儲(chǔ)存條件簡(jiǎn)單
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Optimized for Hollow Fiber Bioreactors
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Increased buffering capacity maintains optimum conditions for protein and antibody production.
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No detergents or other cell membrane stabilizing agents that sometimes interfere with assays or precipitations.
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Composition balanced for high density culture.
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CDM-HD 血清替代物包含成分
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CDM-HD 血清替代物不含成分
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氨基酸與代謝物
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蛋白
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維生素
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水解產(chǎn)物
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微量元素
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不確定試劑
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微量營養(yǎng)素
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動(dòng)物來源成分
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緩沖能力
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類固醇**與多肽
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重組生長因子
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酚紅
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碳水化合物，含1g/L glucose
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表面活性劑
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所有組分分子量不超過3kd
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合成聚合物等高分子量物質(zhì)
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Notes:
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CDM-HD will not require any adaptation but is optimized for cells growing at high density. For best results switch to CDM-HD after cells have reached a high density inside the FiberCell® Systems hollow fiber bioreactor, typically after one week of culture or so.
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CDM-HD does not contain any carbon source. When working with a low glucose medium such as RPMI it is important to supplement the glucose concentration to 4.5 grams per liter.
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CDM-HD is protein free and does not contain any cell attachment factors. When innoculating cells in medium containing CDM-HD add 10% FBS to the cell innoculum only. This will provide the required attachment factors for adherent cells. This is not required for suspension cells though hybridoma cell lines should be treated as adherent cells.
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CDM-HD can be used in other culture systems such as spinner culture and roller culture. For these applications add plurionic F60 or some other cell membrane protecting surfactant.
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CDM-HD is protein free. The secreted protein of interest may be the only significant protein present in your cell culture supernatant. You should re-evaluate your purification protocols as entire steps can sometimes be eliminated, increasing yield. Keep in mind that CDM-HD is protein free and contains no ferritin so the free iron levels will be higher than in standard mediums. Pay attention to any chelating agents that may be part of your buffers or purification protocol.